復方1區！華中科大同濟醫院揭示四物湯通過調節內質網應激信號改善卵巢早衰機制

【寫在前面】：本期推薦的是由華中科技大學同濟醫學院同濟醫院中西醫結合研究所、華中科技大學同濟醫學院同濟醫院中西醫結合科等研究團隊合作近期發表于Phytomedicine(IF8.3）的一篇文章，揭示四物湯通過調節內質網應激信號通路改善化療引起的卵巢早衰。

【期刊簡介】

【題目及作者信息】

Si-Wu-Tang ameliorates chemotherapy-induced premature ovarian insufficiency by regulating a signaling pathway in endoplasmic reticulum stress

背景

卵巢早衰（POI）是一種臨床難治性生殖系統疾病。我們之前的研究表明，中藥配方四物湯（SWT）可能通過改善卵巢血管生成來改善動物模型中的POI，但其潛在機制尚不清楚。

目的

探討中藥復方SWT對人臍靜脈內皮細胞（HUVECs）和POI動物模型的作用機制。通過研究其機制，本研究希望揭示中醫“養血活血”的內涵。

方法

應用超高效液相色譜-四極桿飛行時間質譜（UPLC-Q-TOF/MS）鑒定SWT中的化學成分。在細胞實驗部分，使用4-氫過氧環磷酰胺（4-OOHCY）建立化療誘導的HUVEC損傷模型。檢測內質網應激（ERS）和細胞凋亡水平。應用激動劑和抑制劑來闡明SWT對ERS信號通路的調節作用。在動物實驗部分，分別使用環磷酰胺（CY）建立大鼠和小鼠模型。通過監測發情周期，卵巢指數，組織病理學切片和性激素水平來評估建模和治療效果。采用多種技術檢測卵巢組織和局部微血管中的ER和凋亡水平。

結果

SWT增強HUVEC活力，降低化療誘導的ER，氧化應激和凋亡水平。它還保護了HUVEC的遷移和管形成能力。潛在的機制涉及SWT下調由4-OOHCY觸發的PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信號通路的激活。在POI動物模型中，SWT通過改善ERS和細胞凋亡來恢復低體重，性激素水平，卵泡計數和卵巢血管生成。

結論

總之，SWT通過調節ERS中的PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信號通路來保護HUVEC和POI動物模型的血管生成免受化療誘導的損傷。

圖文摘要

【前言】

卵巢早衰（POI）是一種以40歲以下女性月經不規律為特征的疾病。主要癥狀包括月經過少，血管舒縮不穩定，睡眠障礙，外陰陰道萎縮，性交困難和疲勞。最近的一項薈萃分析顯示，全球POI患病率約為3.5%，發展中國家的女性患病率更高。

目前，POI可用的治療選擇非常有限，主要依靠外源性激素替代療法（HRT）。雖然HRT可以緩解與雌激素缺乏相關的癥狀，并對低雌激素引起的全身并發癥提供一定的預防作用，但它不能恢復卵巢儲備。

四物湯（SWT）是一種治療婦科疾病的經典中藥配方，起源于“仙授理傷續斷秘方”。經過千年的臨床應用，SWT是一種成熟的補血、補血和調節血液循環的處方。在臨床研究中，證明改良SWT與Climen聯合治療POI優于單獨使用Climen。此外，另一項臨床試驗顯示，SWT的煎劑和濃縮制劑均能促進卵泡發育不良患者的卵泡發育。我們之前的研究也證實，SWT通過增強促血管生成因子的分泌來改善POI小鼠的卵巢微環境，血管發育和妊娠結局。為了進一步闡明SWT在卵巢血管生成中的保護機制，有必要使用4-氫過氧環磷酰胺（4-OOHCY）建立體外化療模型，4-氫過氧環磷酰胺是環磷酰胺（CY）的活化類似物。人臍靜脈內皮細胞（HUVECs）是研究血管生成和內皮屏障功能等基本內皮細胞生物學的廣泛接受和良好表征的模型。該用途已在許多研究中得到廣泛驗證，包括POI，多囊卵巢綜合征，卵巢過度刺激綜合征，子宮內膜異位癥，因此我們選擇HUVEC作為離體模型來探索血管生成特性并研究SWT對血管生成的貢獻。隨后，進行轉錄組分析以探索潛在的機制，然后在POI動物模型中進一步驗證。

【結果部分】

1.SWT 的UPLC-Q-TOF/MS分析結果。

2.在人臍靜脈內皮細胞（HUVECs）中建立化療誘導損傷模型及形態與功能 SWT 的保存。

3.轉錄組學分析表明， SWT通過調節內質網中的蛋白質加工過程，對化療損傷的人臍靜脈內皮細胞（HUVECs）具有保護作用。

4.SWT 對人臍靜脈內皮細胞（HUVECs）內質網應激（ERS）、氧化應激、細胞凋亡及增殖的影響。

5.SWT 調節了ERS及凋亡相關分子的基因表達水平。

6.SWT 下調了PERK/ eIF2α /ATF4/CHOP信號通路。

7.SWT 治療改善了POI大鼠模型的卵巢功能。

8.SWT 治療調控了POI大鼠ERS及凋亡相關標志物的基因表達。

9.SWT 治療改善了POI大鼠ERS相關蛋白水平及卵巢細胞凋亡。

10.SWT 改善了POI動物模型中與血管內皮相關的血管生成、濾泡發育及CHOP表達。

11.組織透明化與成像驗證表明， SWT 治療可改善POI模型小鼠的血管生成及卵泡發育。

【結論與討論】

SWT 通過調控PERK/ eIF2α /ATF4/CHOP信號通路，在抑制化療損傷的同時，保護了人臍靜脈內皮細胞（HUVECs）的增殖與血管生成能力，并減少 HUVEC 凋亡。此外， SWT 能全面恢復卵巢損傷（POI）大鼠的生理特征，改善卵巢微環境中的內質網應激（ERS）。本研究為 SWT 作為POI基礎治療方案提供了更多實驗證據，闡明并豐富了 SWT 在‘滋補血液、活血化瘀’方面的中醫內涵。

注：本文原創表明為原創編譯，非聲張版權，侵刪！

中醫藥基礎科研技術服務及加群交流：

相關咨詢，加微信：1278317307。

【福利時刻】科研服務（點擊查看）：、、、、、。咨詢加微信：1278317307。