彎曲菌培養檢測試劑盒雙孔濾膜法方法說明

彎曲菌培養檢測試劑盒雙孔濾膜法方法說明

彎曲菌培養檢測試劑盒雙孔濾膜法使用說明書

作者：深圳市恒昊生物科技有限公司

連續：I73--I806--9I87

（用于家禽、家畜泄殖腔內容物及糞便樣本）

【產品名稱】彎曲菌培養檢測試劑盒（雙孔濾膜法）

【包裝規格】

雙孔板濾膜檢測培養基（10 套／盒，內徑 60mm）；彎曲菌樣本采集液（10*4ml／盒）；

彎曲菌樣本稀釋液（10*10ml／盒）；促生長增菌液（10*4ml／盒）

彎曲菌選擇性濾膜（20 片／盒）

注：雙孔板上蓋如有部分水汽，屬正常現象，不影響使用；增菌液有些許紅色沉淀，屬正常現象，搖勻即可投入使用。

【預期用途】

彎曲菌是重要的人獸共患病原菌之一，可導致動物的流產、減產等。同時許多動物如雞、鴨、豬等是彎曲菌的主要儲存宿主。本分離方法主要適用于泄殖腔及糞便標本中彎曲菌的分離、鑒定。

【檢驗原理】

本產品中的彎曲菌檢測雙孔濾膜培養基是基于彎曲菌的濾膜通透性的分離培養方法，利用細菌的形態及理化特征，以特異孔徑、特異通透性親水性的濾膜，替代彎曲菌的選擇性培養基，解決樣本中耐藥雜菌增高導致的彎曲菌檢測率降低的問題，樣本中彎曲菌的檢出率可達到 101CFU/ml。

【主要組成成份】

雙孔板濾膜檢測培養基：主要由 Clumbia 培養基、Karmali 培養基和無菌脫纖維兔血等組成。

糞便采集液：主要由腦心浸液等組成。

樣本稀釋液：主要由 PBS 緩沖液等組成。

增菌液：主要由脫纖維兔血、彎曲菌生長營養物等營養成分組成。

【貯存條件及保質期】

產品于 2℃-8℃保存，切勿凍藏，增菌液需避光低溫保存，自生產之日起保質期 3 個月。

【糞便標本采集】

（1）采集糞便標本（2 個豆粒大?。?，直接裝入彎曲菌樣本采集管中（含彎曲菌樣本采集液 4ml），4℃運回實驗室，當天進行檢測。2ml 的混勻糞便采集液加入到促生長增菌液(4ml)中，充分混勻，置于微需氧環境下（5% O2、10% CO2和 85% N2）， 37℃或者 42℃增菌培養 24h；

（2）采集泄殖腔內容物、肛拭子，將肛拭子直接放入促生長增菌液（4ml）中，充分混勻，4℃運回

實驗室，將促生長增菌液置于微需氧環境, 37℃或者 42℃增菌培養 24h；

【雙孔板濾膜法檢測方法】

將雙孔濾膜檢測試劑盒中的雙孔板取出，室溫平衡后，將無菌的濾膜輕輕貼在平板的中央表面（有網格面向上），注意不要產生氣泡（可用彎頭鑷子輕輕使膜與平板充分接觸），取增菌培養物或者混有標本的樣本采集液 300ul，分成 4-6 點，均勻滴加于濾膜上，待水分充分透過濾膜后（約 45 min -60min）,輕輕揭去濾膜，翻轉平板于微需氧環境中 42℃或者 37℃,培養 36-48 h。生長于雙孔培養皿上的菌落多為彎曲菌單菌落，但仍需進一步核實鑒定，建議挑取單菌落進行彎

曲菌屬及屬內不同菌種 PCR 鑒定。

【檢驗結果的解釋】

觀察菌落形態，統計細菌種類和菌落數量。正確的標本采集是檢出細菌的基礎，所檢出細菌需經鏡檢、生化鑒定來確認。

【產品性能指標】

1.培養基對質控菌株培養生長率為 100%。

2.培養基對質控菌株培養的重復性為 100%。

3.培養基對質控菌株鑒定的批內不精密度應無差異。

4.培養基對質控菌株鑒定的批間不精密度應無差異。

【注意事項】

1.僅供科學研究使用。

2.全部樣本、微生物培養物和接種產品都應該視為具有感染性的，而且應該由受過訓練的勝任的技術人員操作。在整個操作中，應該遵循無菌操作技術和常規處理菌群的注意事項。

3.不要使用超過有效期及不符合標準規定顏色的培養基。

4.使用前，將培養基從冰箱取出，使其達到室溫。

5.如出現平皿或玻璃瓶破損、變形或包裝損壞的情況，不要使用該培養基。

【生產批號及使用有效期】

見外包裝盒